賽默飛色譜柱損耗快?原因可能是臟了
為什么買的賽默飛色譜柱總是損耗得比較快呢?如果更換了不同品牌的柱子之后,仍然覺得賽默飛色譜柱的壽命表現(xiàn)均低于它們的普遍壽命。那就要看看是不是使用方法不當(dāng)了哦。
自查:
1、是否使用同填料保護(hù)柱(相同品牌);
2、流動(dòng)相從配置到棄用在 12 小時(shí)以內(nèi);
3、流動(dòng)相瓶子嚴(yán)格清洗干燥,密封;
4、濾頭濾膜材質(zhì)和品質(zhì)是否選擇錯(cuò),注意查看是否使用后有溶解現(xiàn)象;
5、使用廠家推薦的沖洗方式?jīng)_洗賽默飛色譜柱。
以上自查項(xiàng)目改善后均不能解決,則采取第二步:
溝通廠家,建議寄回廠家進(jìn)行賽默飛色譜柱“解剖”,月旭經(jīng)過 10 多年專業(yè)“解剖”各種問題賽默飛色譜柱,總結(jié)得出可能原因如下:
原因是賽默飛色譜柱污染
可能的原因
1、樣品組分吸附在賽默飛色譜柱的前端
a、可能是由于樣品在流動(dòng)相中的溶解度低而沉淀出來(lái)的
b、樣品中有強(qiáng)保留物質(zhì)(與鍵合相極性相似的物質(zhì))
c、樣品或者流動(dòng)相中與填料表面發(fā)生微弱的不可預(yù)知的化學(xué)反應(yīng)
d、樣品溶劑本身的pH值在賽默飛色譜柱的耐受臨界值附近,而且進(jìn)樣體積較大(內(nèi)徑4.6mm,上樣體積在 50μl 以上)
通常這樣的情況伴隨柱壓升高;或者柱壓正常,一個(gè)色譜圖中有些峰形異常,有些峰形正常。
解決方法
a、 盡量從根源上解決問題,選擇合適的樣品前處理技術(shù),去除掉強(qiáng)保留物質(zhì),獲得更加“干凈”更加成分單一的樣品;
b、 使用保護(hù)柱,保護(hù)柱的選擇盡量與分析柱同等填料,同等鍵合方法的保護(hù)柱,如果使用不同品牌填料、不同裝填工藝的保護(hù)柱,在分離能力和保護(hù)方面可能得不到好的效果,也不要使用更大粒徑的保護(hù)柱,更大粒徑或者裝填較差的保護(hù)柱會(huì)因?yàn)樗姆逭箤捵饔枚鴮?dǎo)致分離能力下降。
2、流動(dòng)相“臟”了
流動(dòng)相在賽默飛色譜柱中的使用量比樣品要大得多,不停的沖刷賽默飛色譜柱,如果流動(dòng)相變質(zhì)或者有其他的污染物,那對(duì)賽默飛色譜柱的污染會(huì)比樣品更大,賽默飛色譜柱對(duì)流動(dòng)相反而是一種凈化,而且在運(yùn)行梯度時(shí),還會(huì)出現(xiàn)鬼峰。
解決方法
a、 流動(dòng)相配置后盡快使用,多不超過 12 小時(shí);
b、 有機(jī)相和鹽相混合的流動(dòng)相,更容易導(dǎo)致鹽的析出,盡量使用在線混合,且在運(yùn)行梯度時(shí)變化速率不宜太快,避免鹽析出;
c、 用專業(yè)的經(jīng)過鈍化處理過的溶劑瓶裝流動(dòng)相,切忌不能使用塑料瓶,做好密封,在更換流動(dòng)相的時(shí)候同時(shí)更換試劑瓶;
d、 水在接觸空氣或者離開制水設(shè)備以后會(huì)出現(xiàn)變質(zhì),現(xiàn)用現(xiàn)制,打開后盡快使用。