色譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相,以及色譜柱的制備和操作條件。色譜柱固定相是指在色譜分離中固定不動、對樣品產(chǎn)生保留的一相。 柱色譜或平板色譜中既起分離作用又不移動的那一相。固定相的選擇對樣品的分離起著重要作用,有時甚至是決定性的作用。
減少色譜柱固定相流失的主要措施有哪些?
(1)盡量使用高純氣體(純度99.999%以上)作為載氣;
(2)注意載氣的凈化,除去載氣中的氧和碳氫化合物;
(3)所有氣路中的材料和密封件最好為金屬件(不含石墨墊、襯管和色譜柱),以防長期使用中漏氣;
(4)經(jīng)常檢查確保毛細管柱系統(tǒng)的密封性,以防氧和其它物質(zhì)對柱的污染;
(5)柱的使用溫度盡可能低;選擇柱溫時,首先要保證不得超過儀器和固定相的使用溫度極限,其次再根據(jù)樣品組分沸點調(diào)節(jié)柱溫。對于組分簡單的樣品,在保證組份充分分離前提下,一般采用低于樣品的平均沸點10~40℃的柱溫。對于組分復(fù)雜的樣品,應(yīng)采用程序升溫的方式,初溫越高越好,終溫以低于組分中最高沸點10~20℃為宜。
(6)為預(yù)防難揮發(fā)性物質(zhì)進入色譜柱,應(yīng)該進行:
a.進行樣品預(yù)處理;
b.使用填有石英棉的襯管;
c.安裝預(yù)柱等。